超高效液相色谱三重四极杆质谱联用检测饲料中的巴比妥类
药物
摘 摘 要 要：本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪和三重四极杆质谱仪联用测定饲料中巴比妥、
苯巴比妥、异戊巴比妥和司可巴比妥的方法。本方法在 5 min 内快速分离分析四种巴比妥药物，
线性范围和相关系数分别在 1.0-200 µg/L 和 0.9974-0.9992 之间；不同浓度的精密度实验得到的
保留时间和峰面积相对标准偏差分别在 0.02%~0.14%和 0.99%~4.28%之间，结果表明仪器精密
度良好；为了考察方法的灵敏度，在饲料空白样品中添加 0.05 mg/kg 混合标样，4 种巴比妥类
药物均得到较好的响应，优于国标《GB/T 23741-2009 饲料中 4 种巴比妥类药物的测定》中的
要求。
关键词：饲料 巴比妥类药物 超高效液相色谱仪 三重四极杆质谱仪
巴比妥类药物（又称巴比妥酸盐）是一类作用于中枢神经系统的镇静剂，其应用范围可以
从轻度镇静到完全麻醉，还可以用作抗焦虑药、安眠药、抗痉挛药。巴比妥类（barbiturates）
药物是历史较悠久的镇静催眠药。它的种类很多，我国常见的有巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比
妥、戊巴比妥、司可巴比妥及其钠盐等。巴比妥类药物的毒性主要表现在对中枢神经系统的抑
制，还能抑制延脑的呼吸中枢及血管运动中枢。人食入残留有巴比妥类药物的动物组织，可导
致头晕、恶心、呕吐，长期摄入可能产生耐受性和成瘾性。
2002年中华人民共和国农业部公告第176号 《禁止在饲料和动物饮水中使用的药物品种目
录》 中明确规定饲料中禁止添加巴比妥类精神药品。因此建立一个有效的方法检测此类药物，
以便及时查处非法添加行为是十分必要的。本文参考《GB/T 23741-2009 饲料中4种巴比妥类药
物的测定》，使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8040联用，建立了
饲料中巴比妥类药物的检测方法，供相关检测人员参考。
1.  实验部分
1.1  仪器
本实验使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8040 联用系统。具
体配置为 LC-30AD×2 输液泵，DGU-20A 5 在线脱气机，SIL-30AC 自动进样器，CTO-30A 柱温
箱，CBM-20A 系统控制器，LCMS-8040 三重四极杆质谱仪，LabSolutions Ver. 5.75 色谱工作站。
1.2  分析条件
液相色谱优化条件
分析仪器：LC-30A 系统
色谱柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODS II (2.0 mm I.D.× 100 mm L.,2.2 μm)
流动相：A－水，B－乙腈，
流速：0.4 mL/min
4
进样体积：5 μL
柱温：40℃
洗脱方式：梯度洗脱，B 相初始浓度为 30%，时间程序见表 1。
质谱优化条件
分析仪器：LCMS-8040
离子源：ESI，负离子扫描
离子源接口电压：4.5 kV
雾化气：氮气 3.0 L/min
干燥气：氮气 15 L/min
碰撞气：氩气
脱溶剂管温度：250℃
加热模块温度：400℃
驻留时间：80 ms
延迟时间：3 ms
扫描模式：多反应监测（MRM），MRM 参数：见表 2

1.3  样品制备
1.3.1  标准工作曲线配制
用乙腈配制浓度为 200 mg/L 的上述 4 种药物，用 30%乙腈溶液稀释制备得到 1000 g/L
的混合标样；再依次用 30%乙腈稀释得到浓度点分别为 1.0、2.0、5.0、10、20、50、80、
100、200 g/L 的标准工作液用于建立标准曲线。
1.3.2  样品前处理方法
参照国标《GB/T 23741-2009 饲料中 4 种巴比妥类药物的测定》中的样品提取和净化方
法。
2.  结果讨论
2.1  标准样品的 MRM  色谱图
巴比妥类药物混合标样的 MRM 色谱图如图 1 所示。

2.2  线性关系
按 1.2 中的分析条件进行测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，采用外标法建立校
准曲线，如图 2 所示，4 种巴比妥类药物在 1.0-200 µg/L 的线性浓度范围内，线性相关性良
好。线性方程、相关系数及定量限（S/N=10）见表 3。

2.3  精密度实验
配制低中高不同浓度的混合标样依次进样（浓度见表 4），平行测定 6 次，4 种物质的保
留时间相对标准偏差和峰面积的相对标准偏差分别在 0.02%~0.14%和 0.99%~4.28%之间，结
果表明仪器精密度良好

2.4  基质加标实验
选用不含四种巴比妥药物的饲料为空白样品，添加 0.05 mg/kg 的混合标准品，进行基质
加标实验，空白饲料样品的检测色谱图和加标样品色谱图如图 3 和图 4 所示。由表 5 和表 6
结果可知该方法灵敏度高，有较好的准确度和精密度，对于饲料中 4 种巴比妥类药物的测定
可优于国标 GB/T 23741-2009 中的要求

3.  结论
本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱与三重四极杆质谱联用仪测定饲料中巴比妥
类药物的分析方法。该方法在 5 min 内完成 4 种巴比妥类药物的分离分析，线性范围和相关
系数分别在 1.0-200 µg/L 和 0.9974-0.9992 之间。对低中高不同浓度的混合标准溶液进行精
密度实验，连续 6 次进样保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在 0.02%~0.14%和
0.99%~4.28%之间，仪器精密度良好。为了考察方法的灵敏度，在饲料空白样品中添加 0.05
mg/kg 混合标样，4 种巴比妥类药物均得到较好的响应，可优于国标《GB/T 23741-2009 饲
料中 4 种巴比妥类药物的测定》中的要求。实验结果表明该方法快速高效、精密度好、灵敏
度高，可以优于饲料中巴比妥类药物的检测需求。